芻論雞源大腸桿菌耐藥性監(jiān)測
相關(guān)鏈接： 上海安全網(wǎng) 上海質(zhì)量網(wǎng) 上海論文網(wǎng) 上海資訊網(wǎng)
論文關(guān)鍵詞：雞,大腸桿菌,耐藥性
抗菌藥物在畜禽養(yǎng)殖上的應(yīng)用，無論對治療和預(yù)防動物疫病、促進生長，還是提高畜牧業(yè)生產(chǎn)效能方面都起到了積極的作用。但是，隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，細菌耐藥性變得越來越嚴重。動物源性耐藥菌株的存在，直接使抗菌藥物療效降低，病程延長，導致患病動物死亡率升高，帶來經(jīng)濟損失；也可以直接或間接地進入食物鏈傳播給人，造成難以控制的感染，更可能通過動物與動物之間、人與動物之間耐藥基因的傳遞而構(gòu)成潛在危害。同時，耐藥性問題的加劇，迫使養(yǎng)殖行業(yè)不得不加大抗菌藥物使用劑量、頻次和范圍，不僅造成耐藥性的惡性循環(huán)，更引入了藥物殘留的問題。因此，加強抗菌藥物的耐藥性監(jiān)測工作，合理用藥，及早采取措施干預(yù)及控制細菌耐藥性擴展是十分有必要的。一般情況下，大腸桿菌作為條件性致病菌和常在菌往往顯示出細菌的耐藥狀況。為此，選擇上海地區(qū)3個雞場對大腸桿菌的耐藥性進行了監(jiān)測。
1材料與方法
1.1實驗細菌菌株與材料
質(zhì)控菌株：大腸桿菌，ATCC25922，中國獸醫(yī)微生物菌種保藏中心，；飼養(yǎng)場分離菌株，大腸桿菌172株，由上海市獸藥飼料檢測所生物測定室2009年分離自上海3個雞飼養(yǎng)場；營養(yǎng)瓊脂、營養(yǎng)肉湯、麥康凱瓊脂和Mueller-Hinton肉湯，OXIOD公司；API20E試紙，BIOMERIEUX公司；凍干型腸道菌定量藥敏（MIC）檢測板，中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供。
1.2實驗方法
1.2.1樣本采集
以滅菌棉簽拭采雞肛（泄殖腔）和拭子蘸取新鮮糞便，分別對上海地區(qū)3個雞場進行采樣，在采樣同時，詢問飼養(yǎng)場的生產(chǎn)管理情況、疫病發(fā)生情況及抗菌藥物使用情況（包括治療用藥及抗菌促生長劑）。
1.2.2細菌分離與鑒定
按常規(guī)方法接種于麥康凱瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24h，觀察菌落生長情況。挑取粉紅色、邊緣光滑的大腸桿菌可疑菌落，用麥康凱培養(yǎng)基純化一代后接種魚營養(yǎng)瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24h，以API20E鑒定系統(tǒng)進行鑒定。
1.2.3藥敏試驗與結(jié)果判定
藥敏試驗采用凍干型腸道菌定量藥敏（MIC）檢測板使用說明進行操作，結(jié)果判定及質(zhì)量控制按照農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《腸道菌和金葡菌抗菌藥敏感試驗規(guī)程草案和判斷標準》和國際公認的《臨床和實驗標準化委員會》（CLSI）標準執(zhí)行。
2結(jié)果與分析
2.1細菌分離情況
從3個雞場中共采集樣品180份，分離鑒定得到172株大腸[2]桿菌，分離率為95.6%。三個雞場所占比率分別為95.0%、95.0%、96.7%。結(jié)果見表1。
表13個雞場大腸桿菌分離情況
|
雞場大腸桿菌 雞場1 雞場2 雞場3 |
|
采樣數(shù) 60 60 60 分離數(shù) 59 58 59 鑒定數(shù) 57 57 58 分離率（%） 95.0 95.0 96.7 |
2.2分離菌株藥敏試驗結(jié)果
雞大腸桿菌對13種抗菌藥物進行了藥敏試驗，其中耐藥率在90％以上的有恩諾沙星（96.5％）、四環(huán)素（94.8％）、氨芐西林（94.2％）、慶大霉素（93.6％）、復方新諾明（91.3％）；80％以上的有阿米卡星（85.5％）、阿莫西林（82.0％）、氟苯尼考（80.2％）；70％以上的磺胺異噁唑（75.0％）、氧氟沙星（73.8％）；50％以的有頭孢唑啉（52.3％）；40％以的有頭孢噻呋（41.9％），而對粘桿菌素幾乎全部敏感（99.4％），試驗結(jié)果見2。試驗結(jié)果表明上述3個雞場對所檢測的抗菌藥物均產(chǎn)生不同程度的耐藥性，且耐藥性嚴重。
表2雞大腸桿菌藥敏試驗結(jié)果
|
抗菌藥耐藥(R) 中介(I) 敏感(S) 菌株數(shù)比例(%) 菌株數(shù)比例(%) 菌株數(shù)比例(%) |
|
氧氟沙星 127 73.8 29 16.9 16 9.3 恩諾沙星 166 96.5 6 3.5 0 0 四環(huán)素 163 94.8 9 5.2 0 0 慶大霉素 161 93.6 9 5.2 2 1.2 阿米卡星 147 85.5 13 7.6 12 7.0 氨芐西林 162 94.2 8 4.7 2 1.2 頭孢噻呋 72 41.9 19 11.0 81 47.1 頭孢唑啉 90 52.3 4 2.3 78 45.3 磺胺異噁唑 129 75.0 4 2.3 39 22.7 氟苯尼考 138 80.2 8 4.7 26 15.1 復方新諾明 157 91.3 1 0.6 14 8.1 阿莫西林 141 82.0 0 0 31 18.0 粘桿菌素 1 0.6 0 0 171 99.4 |
2.3不同雞場大腸桿菌耐藥性比較
3個雞場分別對13中抗菌藥物耐藥性的比較情況見圖2。由圖2可知，3個雞場大腸桿菌對氧氟沙星、恩諾沙星、四環(huán)素、慶大霉素、復方新諾明及氨芐西林的耐藥率較為一致，均為嚴重；雞場2與雞場1和雞場3比較，對阿莫西林、阿米卡星、磺胺異噁唑、頭孢噻呋及頭孢唑啉的耐藥率低，但雞場2大腸桿菌對阿莫西林（66.7%）、阿米卡星（69.8%）及磺胺異噁唑（71.6%）的耐藥率仍較高；對粘桿菌素幾乎全部敏感。
圖1不同雞場大腸桿菌耐藥性比較2.4雞大腸桿菌耐藥譜
受檢的172株大腸桿菌對13種抗菌藥物表現(xiàn)出不同程度的耐藥性，最少的有3耐，多數(shù)為7耐以上的菌株。有16株（9.3%）為3耐；有32株（18.6%）為4～7耐；有123（71.5%）株為8～12耐；有1株為13耐（0.6%）。其中9耐菌株46株，所占比例最大（26.7%）；其次為10耐、11耐（分別占16.1%、10.0%），結(jié)果見圖2。
圖2雞大腸桿菌多重耐藥性
3討論
3.1關(guān)于藥敏試驗和耐藥譜
試驗結(jié)果顯示，所分離的172株雞源大腸桿菌對抗菌藥物的耐藥性以多重耐藥為主，耐藥性較高的抗菌藥主要是獸醫(yī)臨床使用頻率較高的藥物。這與雞場由于疾病壓力而大量使用抗菌藥物或規(guī)�；u場飼料中長期添加抗生素或促生長劑，細菌的耐藥性通過染色體或耐藥質(zhì)粒在細菌間傳播和擴散有關(guān)。另外，應(yīng)引起重視的是：第3代頭孢菌素類（頭孢唑啉，頭孢噻呋）的耐藥率也漸強；阿米卡星雖在獸醫(yī)臨床上未經(jīng)批準使用，但也出現(xiàn)了較強的耐藥率（85.5%）；獸醫(yī)臨床上使用時間較短的氟苯尼考，在檢測中耐藥率達80.2%。 這表明了大腸桿菌對其適應(yīng)性產(chǎn)生速度之快，也提示獸醫(yī)臨床，抗菌藥物的選擇并非越新的藥物效果越好，而是制定合理、有效的抗菌藥物治療方案，降低細菌耐藥發(fā)生率。
3.2關(guān)于抗菌藥物的使用方法
上述3個雞場在生產(chǎn)中均存在一定程度的濫用藥物現(xiàn)象,用藥過程中的隨意性,用藥劑量和療程沒有按照獸醫(yī)的建議或說明書；抗菌藥物的選擇上沒有考慮采取聯(lián)合用藥、交叉用藥、輪換用藥的方式，均是造成大腸桿菌存在廣泛的耐藥性的原因之一。
參考文獻
1 趙紅梅,金升藻.濫用抗生素對人畜的危害及對策研究[J] .國外醫(yī)藥抗生素分冊,2003,24( 4) : 164- 167.
2 韓偉,顧鳴,肖云民,等.肉雞養(yǎng)殖場沙門菌與大腸桿菌耐藥性的周期監(jiān)測與研究[J].獸藥與飼料添加劑,2007,12 (1) : 4.
3 徐土新.細菌耐藥性與控制抗菌藥物在食品動物中的使用[J].中國獸醫(yī)雜志,2002 (6) :26.
4 Jeffrey L,Thomas R,,Michael Apley,et al. Performance Standards for Antimicrobial Disk and Dilution Susceptibility Tests for Bacteria Isolated From Animals [J].Approved Standard-Third Edition M31-A3,2008,28:66-68.
5 Li J,Nation R L,Turnidge J D,etal. Colistin: the re-emerging antibioticfor multidrug-resistant Gram-negativebacterialinfections [J].Lancet InfectDis, 2006,6(8):589-601.
