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【摘 要】探討不同濃度的大蒜籽水浸液對日本血吸蟲尾蚴及釘螺的殺滅效果。方法 配制不同濃度的大蒜籽水浸液，觀察殺滅日本血吸蟲尾蚴和釘螺的時間；不同濃度的大蒜籽水浸液處理日本血吸蟲尾蚴后感染小鼠，經(jīng)灌注法加撕碎法收集蟲體，計算感染率，實驗設(shè)脫氯清水為對照組。結(jié)果 隨大蒜籽水浸液濃度的升高，殺死日本血吸蟲的平均時間越少。其中濃度為100%時殺死日本血吸蟲尾蚴的平均時間分別2.52s，對照組直至載玻片上清水干燥為止708.29s，仍有活躍尾蚴；用100%濃度的大蒜籽水浸液殺滅全部釘螺的時間為1d，對照組至3.5d后存活率仍有80%。用各濃度的大蒜籽水浸液處理后的日本血吸蟲尾蚴感染小鼠，感染率均為0，對照組為100%。結(jié)論 大蒜籽水浸液對日本血吸蟲尾蚴及釘螺殺滅均有很強作用。　　【關(guān)鍵詞】大蒜籽水浸液；日本血吸蟲；尾蚴　　大蒜 Allium sativum L.（Garlic）又叫蒜頭、大蒜頭、胡蒜、葫、獨蒜、獨頭蒜，是蒜類植物的統(tǒng)稱。半年生草本植物，百合科蔥屬，以鱗莖入藥。春、夏采收，扎把，懸掛通風(fēng)處，陰干備用。6月葉枯時采挖，除去泥沙，通風(fēng)晾干或烘烤至外皮干燥。含有硫胺素、核黃素、尼克酸、蒜素、檸檬醛以及硒和鍺等微量元素。含揮發(fā)油約0.2%，油中主要成分為大蒜辣素，具有殺菌作用，是大蒜中所含的蒜氨酸受大蒜酶的作用水解產(chǎn)生。尚含多種烯丙基、丙基和甲基組成的硫醚化合物等。一般用來治療細(xì)菌性痢疾和阿米巴痢疾。其提取物對多種細(xì)菌、霉菌、病毒等有殺滅或抑制作用，并對釘螺有殺滅作用。我們已報道大蒜籽浸液對日本血吸蟲尾蚴有較好的殺滅效果。為了進(jìn)一步了解大蒜籽浸液的有關(guān)作用，我們對大蒜籽浸液涂膚預(yù)防日本血吸蟲尾蚴感染的效果進(jìn)行了研究。研究不同濃度大蒜籽水浸液對日本血吸蟲尾蚴的殺滅作用，來探尋一種既對環(huán)境無污染，又有高效的滅螺滅尾蚴作用的一類物質(zhì)，來推進(jìn)血吸蟲防治的工作。　　材料和方法　　1 實驗材料　　1.1大蒜籽浸液制備 市場購大蒜籽250g，剝皮，脫氯清水洗凈晾干，多功能食品粉碎機(jī)　　搗碎壓汁即成大蒜籽液（簡稱蒜液）。　　1.2 尾蚴由湖南省血吸蟲病防治研究所提供，實驗當(dāng)日釋放尾蚴。　　1.3 昆明小鼠，3月齡，重量20-25g，雌雄比例各半。　　2 方法　　2.1 殺滅尾蚴試驗 實驗當(dāng)日逸放日本血吸蟲尾蚴。分別吸取各濃度大蒜籽浸液100μl分別置于載玻片上，用接種環(huán)將尾蚴加入玻片上，每片加入活尾蚴100條左右（每濃度做5片），鏡下觀察記錄殺滅尾蚴時間。以解剖針觸及尾蚴，不活動者判為死亡[5]。至尾蚴全部死亡為殺滅尾蚴時間，設(shè)脫氯清水對照組。　　2.2殺滅釘螺試驗 取56個250ml礦泉水瓶，去除瓶口，洗凈。每瓶加入大蒜籽浸液50ml，濃度分別為100%、50.00%、25.00%、12.50%、6.23%、3.13%、1.57%、0.79%，每個濃度6瓶。對照組加入脫氯水。每瓶隨機(jī)加入10只釘螺，各組每天于相同時間隨機(jī)取出一瓶，做存活檢查，活動不明顯者以壓片鑒別死活[6]。　　2.3動物感染試驗 分別取100%、50.00%、25.00%、12.50%、6.23%、3.13%、1.57%、0.79%的大蒜籽浸液100μl于載玻片上，加入血吸蟲尾蚴40條，放置30min后貼于已麻醉的小鼠腹部，感染20min。各濃度組感染5只，重復(fù)實驗2次，40d后解剖，用灌注法加撕碎法收集蟲體。首先經(jīng)上腔靜脈灌注沖洗，解剖鏡下計數(shù)其肝、腸靜脈叢內(nèi)的蟲體數(shù)，灌洗結(jié)束，取下肝、腸，用小鑷子將肝與腸系膜拉碎，檢查、計數(shù)未沖出的蟲體，計算感染率。另設(shè)脫氯清水感染對照組。　　3 結(jié)果　　3.1 殺滅尾蚴作用 濃度分別為100%、50.00%、25.00%、12.50%、6.23%、3.13%、1.57%、0.79%殺滅日本血吸蟲尾蚴的平均時間分別2.52s，9.38s，38.5s，64.64s，　　103.28s，142.8s，194s，294.02s，對照組尾蚴直至載玻片上清水干燥為708.29s，仍有活躍尾蚴。　　3.2殺滅釘螺作用 濃度分別為100%、50.00%、25.00%、12.50%、6.23%、3.13%、1.57%、0.79%大蒜籽浸液殺滅全部釘螺的時間為1、1.5、1.5、1.5、2、2、3、3d，對照組至3.5d后存活率仍有80%。見表一。　　表一 大蒜籽水浸液對釘螺的殺滅結(jié)果　　時間 1d 1.5d 2d 2.5d 3d 3.5d　　濃度（%） 殺滅率（%） 殺滅率（%） 殺滅率（%） 殺滅率（%） 殺滅率（%） 殺滅率（%）　　100 100 100 100 100 100 100　　50 85 100 100 100 100 100　　25 70 100 100 100 100 100　　12.5 65 100 100 100 100 100　　6.23 45 80 100 100 100 100　　3.13 30 75 100 100 100 100　　1.57 30 68 90 100 100 100　　0.79 28 58 80 100 100 100　　對照組 0 0 0 3 12 20　　3.3動物感染實驗 每組感染小鼠分別涂抹濃度分別為100%、50.00%、25.00%、1 本文由wwW. lw54.com提供，畢業(yè)論文 網(wǎng)專業(yè)代寫教育教學(xué)論文和畢業(yè)論文以及發(fā)表論文服務(wù)，歡迎光臨lw54.com2.50%、6.23%、3.13%、1.57%、0.79%大蒜籽浸液，感染率均為0，對照組小鼠均檢出血吸蟲成蟲，感染率為100%。見表二。　　表二 不同濃度的山茶籽餅水浸液殺滅血　　吸蟲尾蚴感染小鼠的實驗結(jié)果　　第一次 第二次　　濃度（%） 解剖小鼠數(shù)（只） 撿蟲數(shù)（個） 無蟲鼠數(shù)（只） 感染率（%） 濃度（%） 解剖小鼠數(shù)（只） 撿蟲數(shù)（個） 無蟲鼠數(shù)（只） 感染率（%）　　100　　50.00　　25.00　　12.50　　6.23　　3.13 5　　5　　5　　5　　5　　5 0　　0　　0　　0　　0　　0 5　　5　　5　　5　　5　　5 0　　0　　0　　0　　0 100　　50.00　　25.00　　12.50　　6.23　　3.13 5　　5　　5　　5　　5　　5 0　　0　　0　　0　　0　　0 5　　5　　5　　5　　5　　5 0　　0　　0　　0　　0　　0　　0　　1.57　　0.79　　對照組 5　　5　　5 0　　0　　123 5　　5　　0 0　　0　　100 1.57　　0.79　　對照組 5　　5　　5 0　　0　　164 5　　5　　0 0　　0　　100　　4 討論　　日本血吸蟲尾蚴是感染人體的階段，主要通過皮膚感染人體�，F(xiàn)階段的日本血吸蟲防御方法有物理、化學(xué)、生物等多方面的方法，主要通過殺滅其中間宿主來實現(xiàn)，其中以化學(xué)方法最為使用[7]。以吡喹酮、五氯酚鈉、氯硝柳胺等物質(zhì)為代表，然這些物質(zhì)雖然能快速殺滅釘螺，但是或存在毒副作用，或存在環(huán)境污染，耗資大等問題。而植物滅螺藥物存在天然無污染，資源豐富，毒性低，易降解等優(yōu)點而備受關(guān)注。許多人開始研究植物滅螺藥物，如劉建兵等（2000），張楚霜等（1995），邊藏麗等（2007），黃瓊瑤等（2003）。在我國已發(fā)現(xiàn)數(shù)十種植物對釘螺有強烈的毒殺作用，如山茶、大蒜、血水草、樟樹葉等等，而大蒜籽滅螺主要是利用其有效成分大蒜辣素陳永軍等，1999）。大蒜籽水浸液是純天然物質(zhì)，對環(huán)境沒有任何污染，且對螺類有良好的毒殺效果。　　本研究結(jié)果顯示，大蒜籽水浸液有較好的殺滅日本血吸蟲尾蚴和釘螺作用。大蒜籽水浸原液在2.32s內(nèi)可迅速殺滅血吸蟲尾蚴，濃度為0.79%大蒜籽水浸液殺滅日本血吸蟲尾蚴的平均時間分別為294.02s，這表明，無論是高濃度還是低濃度的大蒜籽餅水浸液對日本血吸蟲尾蚴的殺滅都較同類植物劑作用強。滅螺試驗結(jié)果顯示，100%濃度的大蒜籽水浸液在1d內(nèi)可全部滅螺，而100%血水草生物堿在72h后才能全部滅螺[6]，低濃度的大蒜籽水浸液在2.5d內(nèi)可全部滅螺，而對照組3.5d存活率仍為80%。這表明，無論是高濃度還是低濃度的大蒜籽浸液對釘螺的殺滅作用很強，能在較短時間內(nèi)殺滅釘螺。同時，處理后的尾蚴感染小鼠實驗結(jié)果顯示小鼠的感染率均為零。對照組的小鼠感染率為100%，表明大蒜籽水浸液可以預(yù)防日本血吸蟲尾蚴的感染，具有開發(fā)前景。本研究結(jié)果為進(jìn)一步探討天然無害性藥物用于控制日本血吸蟲中間宿主和預(yù)防日本血吸蟲感染提供了科學(xué)依據(jù)。　　參考文獻(xiàn)：　　[1]程周旺.“茶油”種種[N].黃山學(xué)院學(xué)報.2010，12（3）：68-70　　[2]朱艷芳等.油茶籽餅水浸液對成鱔和仔鱔的短期毒性影響[J].中國水產(chǎn).2007，377（4）　　[3]王小藝，黃炳球，鄭仲.茶皂素對7種植物病原菌的生物活性初測[J].植保技術(shù)與推廣，1998，18（6）：34-35　　[4]李金洪.茶皂素生物活性探索及其在飼料中的應(yīng)用研究[D].浙江大學(xué)，2001.　　[5]楊蓬，段紅顏等.紫皮獨蒜對日本血吸蟲尾蚴和釘螺的殺滅效果[J].中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志.2012，30（3）：245-246.　　[6]彭飛，黃瓊瑤等.血水草生物堿殺滅日本血吸蟲尾蚴預(yù)防感染的實驗研究[J].中國熱帶醫(yī)學(xué).2003，3（6）：734-735.　　[7]張楚霜.滅螺藥物研制情況之我見[J].中國血吸蟲防治雜志.2003，15（6）：497　　[8]張愛華，邊藏麗等.大蒜籽浸液殺滅日本血吸蟲尾蚴的實驗研究[J].中國血吸蟲防治雜 本文由wwW. lw54.com提供，畢業(yè)論文 網(wǎng)專業(yè)代寫教育教學(xué)論文和畢業(yè)論文以及發(fā)表論文服務(wù)，歡迎光臨lw54.com志.2007，19（3）：227-229.　　作者簡介：　　田金升（1991-），男，長沙醫(yī)學(xué)院12級本科臨床在校生。　　通訊作者：張瓊 （1980-），女，碩士，講師，主要在研究微生物學(xué)的進(jìn)展與教學(xué)。　　基金項目：長沙醫(yī)學(xué)院2014年大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)和創(chuàng)新性實驗計劃項目長醫(yī)教〔2014〕10號-69