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邊瑞玲
包頭輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院食品藥品工程學(xué)院(包頭014035)
摘要主要研究了榛蘑多糖的提取工藝及抗氧化活性。通過響應(yīng)面分析法確定榛蘑多糖提取的最佳工藝條件,即液料比值14 g/L,超聲功率209 W,乙醇質(zhì)量分數(shù)72%,超聲時間44 min。榛蘑多糖具有較強清除.OH的能力。隨著榛蘑多糖濃度的增加,其清除能力逐漸增強。當(dāng)榛蘑多糖質(zhì)量濃度大于0.9 mg/m L時,其對.OH的清除率大于BHT和TBHQ。因此,榛蘑多糖有較好的抗氧化活性。
關(guān)鍵詞榛蘑;多糖;提;抗氧化活性
榛蘑是我國長白山地區(qū)特有的土特產(chǎn),它富含各種人體生長所需的營養(yǎng)物質(zhì),例如亮氨酸、賴氨酸等,有良好的防癌功效,可以預(yù)防人體過早衰老、降低血脂和膽固醇,是人體健康必不可少的營養(yǎng)物質(zhì)。除了健康營養(yǎng)之外,榛蘑還有良好的藥用功能,它與天麻藥理十分相似。目前,一些學(xué)者對食用菌抗癌療效進行了深入分析,發(fā)現(xiàn)其對抑制腫瘤活性有顯著作用。另外,食用菌中的多糖能夠提升其品質(zhì)和藥理功能,越來越多的學(xué)者對食用菌中的多糖利用表現(xiàn)出了濃厚的興趣。從當(dāng)前國內(nèi)外研究現(xiàn)狀來看,關(guān)于食用菌的研究主要集中在黏多糖和萜類化合物提取和利用方面,以進一步擴大食用菌利用價值。目前,國外學(xué)者對榛蘑多糖體外抗氧化活性的研究較少。因此,通過響應(yīng)面優(yōu)化榛蘑多糖提取工藝,在此基礎(chǔ)上,從清除羥基自由基等角度人手,對榛蘑體外抗氧化效果進行深入研究,具有一定現(xiàn)實意義。
1 材料與方法
1.1原料與試劑
榛蘑,當(dāng)?shù)厥惺郏涣姿猁}緩沖液、無水乙醇、葡萄糖、濃硫酸、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、特丁基對苯二酚、硫酸亞鐵等,實驗室提供。
1.2試驗儀器與設(shè)備
BLXK-JA3003B型電子天平:上海精科實業(yè)有限公司;UV-160A型紫外分光光度計:日本島津;RE52CS型高速粉碎機:上海美伊設(shè)備公司;DZF-6030A真空干燥箱:天津通凈儀器設(shè)備有限公司;GVS-10L超聲清洗器:深圳夠威科技公司;等。
1.3試驗方法
1.3.1 工藝流程
1.3.2榛蘑多糖測定
榛蘑多糖的測定采用蒽酮-硫酸法。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為:Y=0.045X+0.015 4,R2=0.996 4。X,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度;y,吸光度。
1.3.3羥自由基(.OH)清除能力的測定
采用鄰二氮菲-Fe2+氧化法測定。
2結(jié)果與分析
2.1榛蘑多糖提取條件的優(yōu)化試驗
2.1.1液料比值對榛蘑多糖提取效果的影響
選取4,8,12,16,20和24 g/L六個水平的液料比值,設(shè)定其他各因素條件,在不同梯度液料比值下,觀察榛蘑多糖提取率變化。由圖1可以看出,液料比值為16 g/L時,榛蘑多糖提取率最大,.OH清除能力也較強。
2.1.2超聲功率對榛蘑多糖提取效果的影響
研究140,170,200,230,260和290 W六個水平的超聲功率對榛蘑多糖提取效果的影響。由圖2可以看出,超聲功率為200 W時,榛蘑多糖提取率最大,.OH清除能力也較強。
2.1.3乙醇質(zhì)量分數(shù)對榛蘑多糖提取效果的影響
研究40%.50%.60%,70%,80%和90%六個水平的乙醇質(zhì)量分數(shù)對榛蘑多糖提取效果的影響。由圖3可以看出,乙醇質(zhì)量分數(shù)為70%時,榛蘑多糖提取率最大,.OH清除能力也較強。
2.1.4超聲時間對榛蘑多糖提取效果的影響
研究20,30,40,50,60和70 min六個水平的超聲時間對榛蘑多糖提取效果的影響。由圖4可以看出,超聲時間為50 min時,榛蘑多糖提取率最大,.OH清除能力也較強。
2.1.5榛蘑多糖提取條件優(yōu)化試驗
以單因素試驗為基礎(chǔ),選取液料比值為12,16和20 g/L.超聲功率為170,200和230 W,乙醇質(zhì)量分數(shù)為60%,70%和80%,超聲提取時間為40,50和60 min,采用響應(yīng)面分析法榛蘑多糖的工藝條件進行優(yōu)化。
分析榛蘑多糖提取條件可知,液料比值、超聲功率、乙醇質(zhì)量分數(shù)和超聲時間這四個因素都是顯著因素。榛蘑多糖得率的二次回歸擬合方程為:
從表3可知,榛蘑多糖提取試驗?zāi)P偷膒<0.000 1.失擬項的p=0.064 5,說明榛蘑多糖提取試驗?zāi)P秃蛯嶋H情況擬合度比較好,所以能對榛蘑多糖提取條件進行預(yù)測。得到榛蘑多糖提取最佳條件為:液料比值14g/L,超聲功率209 W,乙醇體積分數(shù)72%,超聲時間44 min。
2.1.6驗證試驗
依據(jù)設(shè)計表4來進行驗證試驗,以驗證試驗得到的榛蘑多糖提取最佳條件的可靠性。從表4看出,試驗4的得率最高,因此榛蘑多糖提取最佳條件為:液料比值14 g/L,超聲功率209 W,乙醇質(zhì)量分數(shù)72%,超聲時間44 min。
2.2榛蘑多糖抗氧化活性研究
由圖5可知,隨著濃度增大,榛蘑多糖、BHA和TBHQ對.OH清除能力逐漸增強,當(dāng)榛蘑多糖質(zhì)量濃度小于0.9 mg/m L時,其清除.OH的能力小于BHT和TBHQ,當(dāng)榛蘑多糖質(zhì)量濃度大于0.9 mg/m L時,其清除.OH的能力增強得較快,對.OH的清除率大于BHT和TBHQ,且與BHT差異較明顯。當(dāng)榛蘑多糖質(zhì)量濃度達到2.1 mg/m L,其對.OH的清除率可達到90.6%。
3結(jié)論
榛蘑多糖提取最佳條件為:液料比值14 g/L,超聲功率209 W,乙醇質(zhì)量分數(shù)72%,超聲時間44 min,
榛蘑多糖具有較強清除.OH的能力。隨著榛蘑多糖質(zhì)量濃度的增加,其清除能力逐漸增強。當(dāng)榛蘑多糖質(zhì)量濃度大于0.9 mg/m L時,其對.OH的清除率大于BHT和TBHQ。因此,榛蘑多糖有較好的抗氧化活性。
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