雙波長法測定馬鈴薯淀粉中直鏈淀粉含量
相關(guān)鏈接： 中國安全網(wǎng) 中國質(zhì)量網(wǎng) 中國論文網(wǎng) 中國資訊網(wǎng)
劉軼，馮濤*，邴芳玲，高林林，陶亞婷，沈喆
上海應(yīng)用技術(shù)學(xué)院香料香精技術(shù)與工程學(xué)院(上海201418)
摘要使用雙波長分光光度法測定馬鈴薯淀粉中直鏈淀粉的含量。根據(jù)雙波長法的測定原理，確定馬鈴薯直鏈淀粉的測定波長和參比波長，直鏈淀粉分別為610和480 nm，支鏈淀粉分別為550和748 nm。試驗(yàn)結(jié)果表明，該測定方法標(biāo)準(zhǔn)曲線良好，即符合比耳定律。馬鈴薯直鏈淀粉的線性范圍為20～80 μg/m L,相關(guān)系數(shù)為r2=0.999 5，自制馬鈴薯淀粉中直鏈淀粉含量為0.069 9 mg/m L。樣品的平均回收率為92.16%。該方法操作簡單、測定高效準(zhǔn)確，適用于工業(yè)上的批量檢測。
關(guān)鍵詞馬鈴薯；雙波長法；直鏈淀粉
馬鈴薯又名土豆、山藥蛋、洋芋等，是一種古老的茄科一年生植物。馬鈴薯淀粉具有優(yōu)良的特性和獨(dú)特的用途，其支鏈淀粉含量高，直鏈淀粉的聚合度也較高，故結(jié)構(gòu)松散，吸水膨脹力大，易變成黏稠的糊漿。這一特性對(duì)于食品加工有著積極的意義，可作為食品的增稠劑，減少淀粉的用量。因此，測定馬鈴薯淀粉中直鏈淀粉和支鏈淀粉的含量有著重要的實(shí)際意義。
直鏈淀粉含量的測定方法主要有蒽酮法、碘比色法、熱重法、近紅外光譜法、高效空間排阻色譜法、差示掃描量熱法和分光光度法等。蒽酮法的操作過程較為繁瑣，結(jié)果精確度低。碘比色法易受待測淀粉中脂肪和糖分等的影響，造成結(jié)果不準(zhǔn)確。而雙波長法僅用一個(gè)吸收池，且用樣品液自身作參比溶液，可以完全消除吸收池和參比溶液等因素引起的誤差，提高了測定的精確度。同時(shí)，測定的是樣品液在兩波長處的吸光度差值，因此，可以很大程度上提高測定的靈敏度。試驗(yàn)采用雙波長分光光度法測定了自制的馬鈴薯淀粉中直鏈淀粉的含量，以期探討分光光度法測定不同淀粉中直鏈淀粉含量的方法。
1試驗(yàn)部分
1.1試驗(yàn)材料
馬鈴薯淀粉：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；馬鈴薯直鏈淀粉：自制；直鏈淀粉、支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)品：美國Sigma公司。
1.2儀器與設(shè)備
電子天平：上海梅特勒一托利多公司；UV-2102PC型紫外可見分光光度計(jì)：美國尤尼柯公司；pH計(jì)：上海梅特勒一托利多公司；DHG-9145A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱：上海一恒科學(xué)儀器有限公司；EMS-20磁力攪拌水浴鍋：上海喬躍電子有限公司；95-1型恒溫磁力攪拌器：上海梅穎浦儀器儀表制造有限公司。
1.3試驗(yàn)方法
1.3.1碘試劑的配制
稱取碘化鉀2.000 g，溶于適量蒸餾水形成飽和溶液，再加入0.200 g碘，待碘全部溶解后將溶液移至100 m L棕色容量瓶，用蒸餾水定容。
1.3.2直鏈淀粉、支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
分別稱取直鏈淀粉、支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)品0.1 g于50mL燒杯中，加入0.5 mol/L KOH溶液10 m L，沸水浴溶解后，待冷卻后轉(zhuǎn)移至容量瓶，用蒸餾水定容到100 m L，分別得到1 mg/m L直鏈淀粉、支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液。
1.3.3雙波長直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)工作液的制備
1.3.4樣品的制備
采用正丁醇沉降法提取馬鈴薯淀粉中的直鏈淀粉，將烘干后的粗馬鈴薯直鏈淀粉置于索氏抽提裝置中，加入乙醚，加熱回流4h進(jìn)行脫脂處理。脫脂后將樣品晾干，研磨，過100目篩子，置于干燥環(huán)境中備用。
1.3.5樣品處理
稱取約50.00 mg馬鈴薯直鏈淀粉于100 m L燒杯中，加10 m L 0.5 mol/L KOH溶液，在沸水浴中加熱攪拌40 min。待樣品完全溶解、冷卻后，將其轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中，并用蒸餾水定容。取樣品液15 m L兩份于100 m L的燒杯中，分別加蒸餾水15 m L，以0.1 mol/L HC1溶液調(diào)pH 3.5左右。在樣品溶液中加碘試劑1mL，將兩份樣品均定容到100 m L。靜置20 min，
備用。
2結(jié)果與分析
2.1 直鏈淀粉測定波長及參比波長的選擇
根據(jù)雙波長分光光度法測定原理，采用作圖法選定參比波長和測定波長。用UV-2102 PC型紫外可見分光光度計(jì)分別對(duì)直鏈淀粉、支鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行掃描得到吸收光譜，根據(jù)掃描圖譜和等吸收點(diǎn)作圖法的原理，確定直鏈淀粉和支鏈淀粉最大吸收波長分別為610和550 nm，確定直鏈淀粉測定雙波長為610和480 nm，支鏈淀粉測定雙波長為550和748 nm。
2.2直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
以蒸餾水為空白，采用雙波長分光光度法在測定波長610 nm，參比波長480 nm下分別測定吸光度。以直鏈淀粉含量為橫坐標(biāo)，以
為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖1）。直鏈淀粉回歸方程為y=0.011 39x-0.083 85，相關(guān)系數(shù)r2=0.999 5。
2.3穩(wěn)定性試驗(yàn)
取直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液，每隔5 min測定一次吸光度，結(jié)果見表1。表中結(jié)果表明直鏈淀粉標(biāo)準(zhǔn)溶液在25～45 min內(nèi)基本穩(wěn)定。
2.4樣品精密度測定試驗(yàn)
對(duì)同一樣品進(jìn)行重復(fù)測定5次，結(jié)果見表2。由此可以看出，試驗(yàn)方法的重復(fù)性良好，說明雙波長法測定馬鈴薯淀粉中直鏈淀粉具有較高的精密度。
2.5樣品中直鏈淀粉的測定
在波長480 nm和610 nm下分別測定樣品溶液的吸光度，并計(jì)算樣品溶液在兩處波長下吸光度的差值
。將AA樣代人直鏈淀粉回歸方程，即可求出樣品溶液中直鏈淀粉的含量。
通過對(duì)樣品溶液的多次測定，其吸光度的平均值為0.711。根據(jù)直鏈淀粉回歸方程y=0.011 39x-0.083 85，可計(jì)算得出制備出的馬鈴薯淀粉中直鏈淀粉含量為0.069 9 mg/m L。
2.6樣品回收率測定試驗(yàn)
回收率試驗(yàn)結(jié)果（表3）表明，馬鈴薯直鏈淀粉的平均回收率為92.17%，RSD值為0.72%，說明該方法具有較高的準(zhǔn)確度和精密度，可以用于測定馬鈴薯淀粉中直鏈淀粉的含量。
3討論與結(jié)論
根據(jù)試驗(yàn)可以得出，馬鈴薯直鏈淀粉的測定波長和參比波長分別為610和480 nm。直鏈淀粉質(zhì)量濃度在20～80μg /m L線性良好，r2=0.999 46。自制馬鈴薯淀粉中直鏈淀粉含量為0.069 9 mg/m L。平均回收率為92.16%。
雙波長分光光度法作為一種淀粉含量的快速檢測方法，其操作簡單，準(zhǔn)確性好，重復(fù)性好，樣品的回收率高等特點(diǎn)，可以應(yīng)用于馬鈴薯淀粉中直鏈淀粉含量的檢測。
馬鈴薯淀粉中直鏈淀粉僅為17%左右，但是由于馬鈴薯淀粉的高白度、高透明度、高黏度及低糊化溫度等特殊性能，使得馬鈴薯淀粉主要用于制作糖衣、膠囊等方面。因此，通過一些處理方法提高馬鈴薯淀粉中直鏈淀粉的含量對(duì)于工業(yè)生產(chǎn)具有積極影響。通過試驗(yàn)的測定，自制馬鈴薯淀粉中的直鏈淀粉含量達(dá)到了46.55%，比原淀粉中直鏈淀粉含量有了較大幅度提高。
