產(chǎn)品名稱:MG-63人成骨肉瘤細(xì)胞廠家
中文名稱:MG-63細(xì)胞
技術(shù)問答:
1.附著性細(xì)胞繼代時(shí)所使用之trypsin-EDTA 濃度?應(yīng)如何處理?
一般使用之trypsin-EDTA 濃度為0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4 Na。第一次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中, 保存于–20 ℃,避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin 之活性降低, 并可減少污染之機(jī)會。
2,懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?
一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中, 稀釋細(xì)胞濃度即可, 若培養(yǎng)液太多時(shí), 可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高, 直到無法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶, 加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度, 重復(fù)前述步驟即可!
MG-63人成骨肉瘤細(xì)胞廠家細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來,移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時(shí)后.再放入-80度冰箱過夜,第二天放入液氮罐保存
原則:慢凍速溶
4.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi)。凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。最后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。
凍存液是20%FBS 10%DMSO 70%培養(yǎng)基。
細(xì)胞是一個(gè)獨(dú)立有序的,能夠進(jìn)行自我調(diào)控的結(jié)構(gòu)與功能體系。每一個(gè)細(xì)胞都具有一整套完整的裝置以滿足自身代謝的需要。單細(xì)胞生物能夠獨(dú)立地進(jìn)行全部的生命活動。在多細(xì)胞生物中,盡管每一個(gè)細(xì)胞的功能受到整體的協(xié)調(diào)與控制,但每一個(gè)細(xì)胞都是一個(gè)獨(dú)立的,自我控制的,高度有序的代謝系統(tǒng),有相對獨(dú)立的生命活動,各種組織都是以細(xì)胞為基本單位來執(zhí)行特定的功能,整個(gè)機(jī)體的新陳代謝活動都是以細(xì)胞為單位協(xié)調(diào)地進(jìn)行的。
只要具備合適的生存條件,每一個(gè)分離的細(xì)胞都可以在體外生長繁殖,表現(xiàn)出生命的特征。
體外培養(yǎng)的細(xì)胞直接生活在培養(yǎng)基中,因此培養(yǎng)基應(yīng)能滿足細(xì)胞對營養(yǎng)成分,促生長因子,激素,滲透壓,pH等諸多方面的要求。
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