鹿血低聚肽的氨基酸成分分析
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作者：張文
抗氧化肽是目前的研究熱點(diǎn)，一些動(dòng)、植物蛋白在適宜的作用條件下可產(chǎn)生具有抗氧化活性的肽，對(duì)以動(dòng)物蛋白為原料的抗氧化肽的研究，主要集中在草魚、魷魚、藍(lán)園鲹、鰱魚、豬血、雞肉等 。試驗(yàn)前期研究了馬鹿血低聚肽的抗氧化活性，在此基礎(chǔ)上，分析了實(shí)驗(yàn)室按工業(yè)化生產(chǎn)條件自制的馬鹿血低聚肽的氨基酸組成，通過AAS和CS對(duì)鹿血低聚肽進(jìn)行了營養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)，并對(duì)鹿血低聚肽氨基酸組成與抗氧化活性的關(guān)系進(jìn)行初步分析，旨在為鹿血低聚肽作為具有抗氧化活性的營養(yǎng)補(bǔ)充劑的生產(chǎn)和應(yīng)用提供參考依據(jù)。
1 儀器、試劑與材料
1.1儀器與設(shè)備
RART NO．835-0200氨基酸自動(dòng)分析儀：日本 Hitachi：ZFD-5090電熱恒溫干燥箱：上海至誠分析儀器制造廠。
1.2試劑
濃鹽酸、苯酚、檸檬酸鈉、氫氧化鈉、氯化鈉、茚三酮、乙酸鋰、氫氧化鋰、二甲基亞砜、冰乙酸均為分析純，高純氮?dú)猓杭兌?9.99%。
1.3材料
鹿血低聚肽（由中科院西北特色植物資源化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供）：為白色粉末，系新鮮馬鹿鹿血經(jīng)酶解、分離、脫色所得，經(jīng)HPLC測定其中90%內(nèi)容物分子量小于1000 Da。
2方法
2.1 溶液的配制
試驗(yàn)中所用溶液均按照GB/T 5009.124-2003方法配制。
2.2氨基酸含量測定
精密稱取10 mg鹿血低聚肽，置于安培瓶中，加入6 mol．L-1鹽酸，抽真空、充氮?dú)饷芊夂笤?10℃±1℃水解22 h，反復(fù)減壓蒸干去掉HCI。然后用1mL pH為2.2的磷酸緩沖液溶解，用氨基酸自動(dòng)分析儀進(jìn)行測定[2]。
2.3鹿血低聚肽營養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)指標(biāo)的計(jì)算
2.3.1 必需氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)的計(jì)算
必需氨基酸( EAA)含量與氨基酸總量(TAA)之比( EIT)，必需氨基酸與非必需氨基酸(NEAA)之比( EIN)按式(1)~(2)計(jì)算。
2.3.2氨基酸評(píng)價(jià)指標(biāo)的計(jì)算
根據(jù)FAO/WHO/UNU 1985年推薦的氨基酸評(píng)分模式[4] ，選擇成人組評(píng)分模式按式(3)~(4)計(jì)算鹿血低聚肽中必需氨基酸評(píng)分( AAS)和化學(xué)評(píng)分 ( CS)。
3結(jié)果與分析
3.1 氨基酸組成及必需氨基酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)鹿血低聚肽氨基酸含量測定結(jié)果，見表1。
鹿血低聚肽中含有豐富的甘氨酸、谷氨酸、精氨酸、賴氨酸、酪氨酸，此類氨基酸的攝人可調(diào)節(jié)氨基酸在體內(nèi)的吸收，保證蛋白質(zhì)的營養(yǎng)均衡；大量的賴氨酸和精氨酸，能刺激合成代謝激素的分泌，促進(jìn)肌肉生長；支鏈氨基酸（如亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸）含量達(dá)17.99%，可以作為能源物質(zhì)提供能量。
根據(jù)FAO/WHO提出的理想模式，蛋白質(zhì)氨基酸組成EAA/TAA在40%左右而FAA/NEAA在60%以上說明蛋白質(zhì)質(zhì)量較好。鹿血低聚肽中總氨基酸含量達(dá)到74.49%，其中必需氨基酸含量為36.87%，EAA/TAA值為49.5%，EAA/NEAA值為98%。因此，鹿血低聚肽是優(yōu)質(zhì)的蛋白源。
3.2氨基酸評(píng)分和化學(xué)評(píng)分
試驗(yàn)以粗蛋白為基數(shù)計(jì)算氨基酸評(píng)價(jià)指標(biāo)，結(jié)果見表2。
如表2所示，和大多數(shù)良好的食物蛋白源（如雞蛋、牛奶等）相同，鹿血低聚肽的第一限制性氨基酸仍是色氨酸，除色氨酸外其他必需氨基酸含量都高于WHO/FAO推薦值，均能滿足人體需要；其AAS和CS均較高。
3.3鹿血低聚肽抗氧化活性氨基酸含量
鹿血低聚肽中含硫氨基酸的總量為33.3 mg．g-1，疏水性氨基酸含量為274.7 mg．g-1，與抗氧化活性相關(guān)的氨基酸[5-7]總量為308 mg．g。1，占氨基酸總量的30.8%，與試驗(yàn)前期對(duì)鹿血低聚肽抗氧化活性的研究結(jié)果[1}-致。
4結(jié)論與討論
鹿血低聚肽中總氨基酸含量達(dá)到74.49%，賴氨酸和精氨酸含量為9.12%，能促進(jìn)肌肉生長；支鏈氨基酸含量達(dá)17.990/0，能作為能源物質(zhì)提供能量；
鹿血低聚肽中必需氨基酸含量為36.87%，EAA/TAA值為49.5%，EAA/NEAA值為98%，與抗氧化活性相關(guān)的氨基酸占氨基酸總量的30.8%。據(jù)文獻(xiàn)[8]，生物活性肽大致可分為生理活性肽、抗氧化肽、調(diào)味肽和營養(yǎng)肽。因此，鹿血低聚肽不僅有營養(yǎng)價(jià)值，還有生物活性，可作為優(yōu)質(zhì)蛋白源和生物活性肽開發(fā)。
5摘要
利用GB/T 5009.124-2003方法測定鹿血低聚肽的氨基酸組成，通過AAS和CS評(píng)價(jià)了鹿74.49%營養(yǎng)價(jià)值’并對(duì)其氨基酸組成與抗氧化活性的關(guān)系進(jìn)行初步分析。結(jié)果顯示，鹿血低聚肽總氨基酸含量達(dá)到74.49%，其中必需氨基酸含量為36.87%, EAA/TAA值為49.5%, EAA/NEAA值為98%; AAS和CS均較高，第一限制性氨基酸為色氨酸，除色氨酸外其他必需氨基酸含量都高于WHO/FAO推薦值，均能滿足人體需要。鹿血低聚肽中與抗氧化活性相關(guān)的氨基酸占總量的30.8%，與鹿血低聚肽的抗氧化活性一致。關(guān)鍵詞 鹿血低聚肽；氨基酸；EAAI;抗氧化活性
